تحديد خصائص مورث الحثل العضلي في المرضى العراقيين المصابين بالضمور العضلي.

الملخص

خلفية البحث : تعتبر انواع الحثل العضلي التي تحدث بسبب اعتلال مورث الدستروفين  من اشهر انواع الحثل العضلي وتتمثل بالحثل العضلي الدوشيني و الحثل العضلي البيكرز وتتضمن هذه الطفرات انواع متعددة منها طفرات الحذف الكبيرة (65%), طفرات التكرار (5%) و الطفرات النقطية (30%), وهي بمجموعها مسؤولة عن نقصان كمية بروتين الدستروفين الفعال في الالياف العضلية مما يؤدي الى تلف هذه الالياف و اصابتها بالاعتلال.

الهدف : تهدف هذه الدراسه الى استكشاف معدل و انتشار طفرات الحذف في 10 اكسونات من مورث الدستروفين في مجموعه من المرضى العراقيين المصابين بالحثل العضلي الدوشيني/ البيكر وذلك باستخدام تقنيه تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد.

المرضى و طرق العمل : تعتبر هذه الدراسه دراسه مستقبلية لدراسة الحالة و التي تضمنت 27 من المرضى المشخصين بالاصابة بالحثل العضلي الدوشيني/ البيكر اضافة الى 6 الحاملين المتوقعين للمورث المرضي. وتم اخذ موافقات كتابية من المرضى او عائلاتهم للموافقه على المشاركة في الدراسه بالاضافه الى موافقه اللجنه الاخلاقيه في كليه الطب. كما وتم ادخال 46 شخص معافين  الى الدراسه لاستخدامهم كمجموعة قياسية. تم جمع نماذج الدم في انابيب (5-6) مل تحتوي مادة EDTA بواسطة السحب الوريدي. تم استخلاص الحمض النووي باستخدام استخدام عدة ( PROMEGA/USA) وتم فحص الكمية المستخلصة بواسطة  جهاز فحص امتصاص الاشعة فوق البنفسجية (UV- absorbance).عشرة اكسونات في مورث الحثل تم فحصها (19و45و46و47و48و49و50و51و52و53) باستخدام الممهدات المصنعة بالمكملات التراتبية وتم وضعها في خمسة مجموعات لتقنية تفاعل البلمرة المتسلسل المتعددة. حيث ان كل مجموعه تضخم اثنين من الاكسونات. هذه الممهدات تكشف طفرات الحذف في هذه الاكسونات في المرضى والحاملين المحتملين لهذه الطفرات. تم اشراك مجموعة قياسية في الدراسة لغرض التحقق من صحة العمل. تستخدم المجموعات المضخمة بعد ذلك في جهاز الترحيل الكهربائي ويتم تصويرها بواسطة نظام الكاميرا فوق البنفسجية.

النتائج : كان معدل الاشخاص المصابين بطفرات الحذف لجميع الاكسونات واضح في المرضى (85,2%) مقارنة بالحاملين المحتملين للطفرات (33,3%). ان انتشار هذه الطفرات كان واضح احصائيا بين المرضى مقارنة بالحاملين المحتملين للمرض. كانت نسبة تكرار طفرات الحذف بين الذكور اعلى (82%)   من مثيلاتها في دراسات المقارنة ولم تظهر المجموعه القياسية اي طفرات في جميع الاكسونات المحددة في هذه الدراسة.

الاستنتاج : تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد لاظهار معدل طفرات الحذف في عشرة اكسونات ضمن مجموعه محدده من المرضى العراقيين المصابين بالحثل العضلي الدوشيني/البيكر . ان الانتشار الكلي لطفرات الحذف في منطقة  البقعة الساخنة القاصية  كان اعلى من المعدلات المستحصلة في مرضى تم دراستهم في اماكن اخرى. تخدم هذه الدراسة كنقطة بداية في تحريات وراثية اضافية خاصة لمرضى الحثل العضلي الدوشيني/البيكر في العراق.